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非洲猪瘟CT值:18、35、39是阳性吗?

非洲猪瘟CT值:18、35、39是阳性吗?
什么是非洲

非洲猪瘟(African SwineFever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African Swine FeverVirus,ASFV)引起猪的一种急性、烈性、高度接触性传染病。非洲猪瘟的发病率和死亡率可达100%,严重危害着全球养猪业,造成难以估量的经济损失。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病,我国将其列为一类动物疫病。

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温馨提示

1、非洲猪瘟不是人畜共患病虽然对猪有致命危险,但对人没有危害。

2、猪肉可以安全食用。一方面疫区的所有生猪均会被扑杀并无害化处理,理论上买不到被非洲猪瘟病毒感染的猪肉。另一方面非洲猪瘟病毒在高温下容易被破坏,当温度达55℃持续30min或60℃持续10min,非洲猪瘟病毒可以被杀灭。

非洲猪瘟诊断技术

目前非洲猪瘟没有疫苗和有效的治疗手段,主要通过实验室诊断方法对非洲猪瘟进行监控和控制。非洲猪瘟病毒实验室诊断技术包括病原学检测技术和血清学检测技术,详见下图(图1)。在所有的检测技术中,最受关注的荧光定量PCR(qPCR)法。qPCR法是OIE推荐使用的非洲猪瘟常规诊断的重要工具,也是中国在目前非洲猪瘟流行情况下常用检测技术。

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图1:非洲猪瘟病毒实验室诊断技术。参考联合国粮食及农业组织(FAO)《动物生产及动物卫生手册》。

非洲猪瘟病毒qPCR检测操作流程

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样本采集

样本来源包括:

样本采集时应注意穿戴个人生物安全防护装备,实施现场消毒和废弃物处理。

1)活猪:血液,扁桃体液等液体样品。

2)病死猪:脾、肺、肾、淋巴结、肌肉等组织样品。

3)周边环境:饲料、车辆、粪便、污水、栏舍等均周边环境样品。


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图2:非洲猪瘟检测样本。

病毒核酸提取

病毒核酸提取前,一般血液、扁桃体液等液体样品不需处理,直接用病毒核酸提取试剂盒提取样品gDNA,对于耐抑制性能较强的qPCR试剂,也可以直接取液体样品进行下游qPCR实验。但组织样品在进行病毒核酸提取前,需要进行研磨裂解处理。

病毒核酸提取具体操作可参照所用病毒核酸提取试剂盒说 明书。

qPCR检测

qPCR检测步骤包括配制qPCR反应体系和加样上机检测。每次检测试验都需要设立阳性对照和阴性对照组。具体操作可参照所用qPCR试剂盒说明书。

结果分析

1、质控标准

1)阴性对照的Ct值应>38或无Ct值。

2)阳性对照的Ct值应≤35,并出现典型的扩增曲线。

3)若阴性和阳性对照不满足以上条件,此次实验视为无效。

2、样品结果判定

1)阴性:检测样品的Ct值>38或无Ct值,表明样品为阴性。

2)阳性:检测样品的Ct值≤35,且出现典型的扩增曲线,表示样品为阳性。

3)可疑:检测样品的35<Ct值≤38,且出现典型的扩增曲线,应重检,重检仍出现上述结果的判为阳性,否则判为阴性。

非洲猪瘟检测的意义

1)确诊发病猪是否感染非洲猪瘟病毒,没有感染,采取治疗和综合防控措施。感染非洲猪瘟温度则需立即上报,进行无害化处理。

2)通过检测确定进场原料、水、物品、猪只、车辆等无非洲猪瘟病毒污染,切断病原进入猪场

3)发病猪场复养之前进行检测,检测和核验猪场内消毒效果,确定猪场内无非洲猪瘟病毒残留。

总之,非洲猪瘟病毒检测能帮助我们及时确诊发病猪只,完善疫病防控的工作流程,弥补生物安全的漏洞,只有灵活运用检测工具,结合生物安全的其他手段,才能做好非洲猪瘟的防控工作。

我们的非洲猪瘟检测产品

Hieff Unicon® TaqMan qPCR 系列 

特异性强、灵敏度高、数据准确、兼容多重 qPCR,能准确快速的检测出非洲猪瘟病毒。

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图3:进行三重qPCR检测,扩增效率接近100%,灵敏度低至pg级别。


客户反馈 

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图4:以猪血液gDNA为模板,NTC无扩增不起峰,14个非洲猪瘟样本均能有效检测,结果为阳性。

定制服务

为满足您的个性化需求,我们的荧光定量产品可以为您量身定制!

1)我们可根据您的项目需求进行产品开发与优化。

2)我们可提供无甘油的酶原料,方便将试剂制作成冻干粉形式,用于常温运输保存。

3)我们可根据您的反应体系的不同提供相应浓度的预混试剂,无需二次稀释,只需加入引物探针即可。

点击定制

相关产品

检测方法

产品名称

货号

规格

定量PCR

Hieff® HotStart Taq DNA Polymerase(配体法热启动DNA聚合酶)

10110ES72

250 U

Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase(抗体法热启动Taq酶)

10113ES60

100 U

Hieff Unicon® qPCR TaqMan Probe Master Mix(单重)

11205ES08

5 mL

Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix(多重)

11208ES08

5 mL

等温扩增

Bst II DNA polymerase

12908ES60

1600 U


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